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经方茵陈蒿汤的化学研究

来源:化学进展 【在线投稿】 栏目:期刊导读 时间:2021-07-17
作者:网站采编
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摘要:第5卷第8期2009年8月亚太传统医药MedicineAsia-PacificTraditionalVOL5No.8Aug.2009经方——茵陈蒿汤的化学研究高汤
第5卷第8期2009年8月亚太传统医药MedicineAsia-PacificTraditionalVOL5No.8Aug.2009经方——茵陈蒿汤的化学研究高汤阴孟姝1,邢尚2(1.盐城卫生职业技术学院药学系,江苏盐城224006;2.淮安市洪泽药品检验所,江苏淮安223100)摘要:通过查阅相关文献资料,综述了茵陈蒿汤的化学成分及其药理作用的研究进展。茵陈蒿汤自张仲景以来,历代都是通过将其药味加减来治疗黄疸,现代研究表明,茵陈蒿汤不仅具有抗肝损伤的作用,还具有抑制肝纤维化,利胆、抗炎镇痛作用等,并明确了其有效成分。关键词:茵陈蒿汤;方荆;化学进展;肝纤维化中图分类号:R285文献标识码:A文章编号:1673—2197(2009)08—0173—03茵陈蒿汤作为治疗黄疸的名方,出自张仲景《伤寒论》,历代名医都将其作为治疗黄疸的首选,而且根据自己的经验及疾病的情况将其药味加减使用。近年来,国内外研究者对其药效学、有效的化学成分进行了大量研究,并阐述了其对急性黄疸、急性肝损伤及肝纤维化等治疗作用的机理。本文就茵陈蒿汤的化学成分及其药理作用的研究进行综述。1茵陈蒿汤化学成分的研究1.1茵陈蒿化学成分的研究茵陈蒿汤中茵陈蒿来源于茵陈蒿的干燥幼苗,其主要化学成分如下:(1)香豆素类:茵陈蒿中主要含有6,7-二甲氧基香豆素(6,7-dimethoxycoumarin,DMOC)[13。茵陈蒿的香豆素类物质具有利胆的作用,对心血管系统疾病也有一定的疗效。(2)黄酮类成分:茵陈蒿中含茵陈黄酮、5,3’,4,-三羟基一6,7-二甲氧基黄酮、蓟黄素和3'-甲氧基蓟黄素等,这4个黄酮类成分对四氯化碳损伤的原代培养大鼠肝细胞具有保护作用[2],茵陈黄酮、蓟黄素和3’一甲氧基蓟黄素还具有抗肝毒素作用[3]。(3)色原酮类:茵陈蒿中含茵陈色原酮、7一甲基茵陈色原酮、47一甲基茵陈色原酮和6一去甲氧基一47一甲基菌陈色原酮等,茵陈色原酮除有保肝利胆作用外,还是抗肿瘤的有效成分[4]。(4)有机酸类:茵陈蒿中含绿原酸[5]、茵陈香豆酸A、B等有机酸类,均具有利胆作用[4|。(5)挥发油类:有人鉴定出茵陈蒿中含有42个挥发油成分,主要是O-xylene,1,3,5-cycloheptatriene和Germa—creneD等,大部分是炔类、单萜类和倍半萜类等,具有杀菌、抗菌活性[6]。另外,茵陈蒿中还含有水溶性多肽类[7],其具有肝保护和增强巨噬细胞吞噬能力的功能。1.2大黄化学成分的研究(1)蒽醌类成分:目前从大黄中已经分离出来的蒽醌类成分可分为游离型和结合型两类,其中游离型有大黄酸、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚、大黄素甲醚等[8];结合型主要包括蒽醌苷和双蒽醌苷,双葸醌苷中主要是番泻苷A-F[9]。大黄中的葸醌类具有抗癌[8|、抗菌消炎Do]、保肝利胆[1l‘12]、抗氧化[133和泻下Eft]等作用。(2)鞣质:大黄中鞣质类成分较丰富,其质量分数达到了lO%~30%,鞣质可以分为水解型和缩合型两类,没食子酸、d-JL茶素则分别是这两类鞣质的单体,其具有抑制胃排空,减少胰酶分泌的作用[15],此外,还具有抑菌、止血、抗凝血和抗炎镇痛等作用[16I。(3)芪类成分:有研究报道,从大黄的根茎中分离出5种芪类成分,分别为土大黄苷元,piceatannol,白藜芦醇,3’,4’,5一三羟(基)芪,rhaponticin.2”一O-gall—ate和rhaponticin-6"-O-gallate,并证实它们能够抑制被脂多糖激活的巨噬细胞产生No的活性DT]。(4)挥发油成分:大黄中的挥发油以酸类和酯类成分较多,有棕榈酸、二十六烷酸、棕榈酸乙酯和邻苯二甲酸二丁酯等,具有抑菌[18]和抗HBV病毒作用[19]。(5)大黄多糖:研究发现大黄多糖类成分具有降低Caspase3表达,从而抑制Fas/FasL途径引起的结肠上皮细胞的凋亡,同时增加PMN凋亡率,减少PMN向结肠的募集,从而减轻肠道局部免疫反应,起到治疗溃疡性结肠炎收稿日期:2009—04—10作者简介:孟妹(1985一),女,江苏盐城人,盐城卫生职业技术学院药学系助教,研究方向为药物化学。?-———173—?-——万方数据第5卷第8期2009年8月亚太传统医药Asia-PacificTraditionalMedicineV01.5No.8Aug.2009的作用Fzo],另外还有抗氧化[21]、抗肿瘤及免疫增强作用[22]等。1.3栀子的化学研究(1)栀子甙类:栀子中含有大量的栀子甙类成分,目前已发现的有:京尼平苷、羟异栀子甙、山栀子甙、栀子酮甙、鸡矢藤次甙甲酯、去乙酰基车叶草甙酸甲酯及栀子甙酸等多种化合物[23]。最主要的成分是京尼平苷,其主要的药理作用有:能诱导小鼠肝细胞中GST活性和GSTM1和GSTM2亚单位的表达来产生解毒[z4]、利胆[25]、抗凝血[26]、抗炎[27]等。(2)色素类成分:色素类成分含有藏红花素、藏红花酸等成分,目前藏红花素已经广泛应用于食品添加剂[28],药理实验表明[29]藏红花素对四氯化碳损伤的小鼠具有保护、降血脂作用。(3)有机酸类:目前已经分离出的有机酸类有氯原酸、3,4一二咖啡酰一5(3-羟基一3一甲基戊二酰)奎尼酸、3,4一二氧一咖啡酰奎尼酸、脂环酸苦藏红花酸、3一氧一咖啡酰一4一氧一芥子酰奎宁酸等[23],研究较多的是绿原酸,其具有显著的抗炎活性[30J。(4)挥发油成分:有研究[31]采用超I临界萃取的方法从栀子中分离出60种挥发油成分,其主要成分是亚油酸、棕榈酸、反,反一2,4一癸二烯醛等。(5)多糖类:栀子中除含有环烯醚萜苷类、色素类、有机酸类成分外,还含有栀子多糖,其质量分数达到了4.6%[32],其具有抗肿瘤活性[33|。2茵陈蒿汤药理作用研究进展近年来,茵陈蒿汤的研究发展速度很快,在药理上建立了“体外化学一血清药化学一药效相关性研究一药物代谢动力学研究”F341的研究途径,为经方的科学化研究建立了一条理想的途径。现将茵陈蒿汤方剂的药理学研究进展总结如下:2.1对肝损伤的保护作用实验表明:茵陈蒿汤具有保肝作用,一般认为6,7-二甲氧基香豆素为保肝的主要成分,因为它为菌陈蒿汤在血中的主要移行成分,其可以抑制CCl4造成的肝体比的上升,阻止了血中ALT水平的提高及MDA的形成,具有抗脂质过氧化而起到保肝作用[35];也有实验证实大黄中的蒽醌类[36]具有保肝作用,其可以抑制C_X]14所致的急性肝损伤小鼠血清中SGPT的升高及TP、ALB的下降而起到保肝作用。但有实验[37]显示茵陈蒿汤的保肝作用是全方共同作用的结果。因为茵陈蒿汤的醇提物对D氨基半乳糖诱导的大鼠肝细胞损伤ALT升高的降低作用优于其复方中任一单一药材的醇提物。2.2抑制肝的纤维化目前,国内外学者对于茵陈蒿汤抑制肝纤维化的作用机制研究较多,由于肝星状细胞在肝纤维化病变过程中起中枢作用,因此多将肝星状细胞作为研究的靶细胞。Yuki—hiroImanishiDZ]等研究了茵陈蒿汤对硫代乙酰胺诱导的大鼠肝纤维化的影响,结果发现茵陈蒿汤能够显著降低大鼠肝组织中胶原的沉积及平滑肌旷肌动蛋白的表达,降低血清中透明质酸的水平,在体外也能抑制原代培养星状细胞的DNA的合成及I、Ⅲ型胶原和纤维连结蛋白(FN)的mRNA表达,并证实茵陈蒿汤是通过抑制血小板衍生生长因子受体口亚单位(PI)GFR-/D的磷酸化和下游的信号通路抑制血小板衍生生长因子一BB(PDGF—BB)刺激的肝星状细胞的DNA合成与细胞迁移来起作用,其中最有效成分是大黄素。HitoshiIkeda等[38]通过观察给药后肝星状细胞形态学的改变证实茵陈蒿汤是通过诱导星状细胞的凋亡从而抑制肝的纤维化。IsaoSakaidal等[39]发现茵陈蒿汤对肝纤维化和肝硬化的保护作用呈现剂量依赖性。2.3利胆作用聂风裎等[40]研究了茵陈蒿汤利胆作用与胆囊昼夜生物节律的相关性,应用B超观测胆囊形态学的改变发现,茵陈蒿汤具有利胆作用,且子、酉时给药优于午、卯时。李兰芳等[41]研究了菌陈蒿汤分煎、合煎对利胆作用及腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,结果显示茵陈蒿汤能够显著增加大鼠胆汁的排出量,而且药效学显示分煎、合煎无显著性差异。2.4抗炎镇痛作用朱江等[42]研究了茵陈蒿汤的抗炎镇痛作用,用醋酸、角叉菜和棉球作为致炎因子,观察了茵陈蒿汤对实验性渗出、肿胀、增生和疼痛的影响,结果发现其在高剂量(3.0g/kg)时对醋酸诱发的血管通透性增加、角夹菜所致大鼠足肿胀作用、棉球致肉芽组织增生及醋酸诱发的小鼠扭体反应的抑制率分别达到了41.2%、47.o%、50.1%和59.8%,提示茵陈蒿汤有显著的抗炎镇痛作用。2.5调节血脂、降血糖作用潘竞锵等[431研究了茵陈蒿汤对正常的和多种糖尿病模型动物血糖的影响,结果显示茵陈蒿汤能拈抗ALX诱导小鼠的高血糖,明显降低正常小鼠和四氧嘧啶致糖尿病小鼠的FBG,具有与磺脲类药物和双胍类药物相类似的降糖作用。朱江等[44]研究了菌陈蒿汤的调血脂的作用,结果发现其可显著降低高脂饲料引起的实验大鼠的甘油三酯,血清胆固醇和低密度脂蛋白一胆固醇。3“茵陈蒿汤”的研究思路与方法茵陈蒿汤作为治疗肝脏疾病有效的良方,已经引起国内外研究者的广泛关注,对菌陈蒿汤进行了大量的研究。国内学者在药理上建立了“体外化学一血清药化学一药效相关性研究一药物代谢动力学研究”[34]的研究途径,国外万方数据第5卷第8期2009年8月亚太传统医药MedicineAsia-PacificTraditionalVok5No.8Au舀2009的学者从细胞水平对茵陈蒿汤治疗肝胆疾病的机制进行了大量研究,下面从细胞水平研究茵陈蒿汤的思路提出个人认识。目前研究机制认为肝星状细胞在肝纤维化病变过程中起中枢作用,星状细胞(HSC)是肝脏细胞外基质(ECM)的主要来源,口-平滑肌肌动蛋白(a—SMA)是其活化的主要标志,HSC活化后I、Ⅲ、Ⅳ型胶原表达均明显增加,这是肝纤维化形成的细胞学基础;同时发现HSC能够吞噬凋亡的肝实质细胞,并释放出促进凋亡的配体和致纤维化的因子,而研究表明茵陈蒿汤在体外能够抑制HSC的DNA合成和a-SMA表达,并可抑制HSC的收缩功能而起到抑制肝纤维化的作用。但是茵陈蒿汤对于已经激活的HSC的影响还没有报道,因为激活的HSC可能主要通过凋亡来消除,这已被证实是肝纤维化消退的主要机制之一,因此可以对茵陈蒿汤促使激活的HSC凋亡的机制进行研究,这对于晚期肝硬化黄疸的治疗极其重要,应该在细胞水平上继续研究茵陈蒿汤在肝硬化晚期促进HSC凋亡的作用机制,这将为肝脏疾病的治疗带来广阔的前景。参考文献:I-1]谭永忠.戴圜华,李军.茵陈素对肺癌细胞增殖和细胞周期的影响口].中国药房,2001,12(5):267-268.[2]熊玉兰,周钟鸣,王彦礼,等.茵陈有效成分对四氯化碳损伤的原代培养大鼠肝细胞的作用[J].中国实验方剂学杂志,2002,8(1):32—34.[3]林生,张启伟,张宁宁,等.高效液相色谱法测定花蕾期茵陈中黄酮类成分的含量[J].中国中药杂志,2005,30(4):591—594。[4]褚明艳。胡一桥,谭f-祥.茵陈蒿的化学及药理学研究进展[J].中草药,1998,29(8):564—566.[53宋小军,张永欣,张颖,等.绵茵陈药材中绿原酸定性定量方法研究[J].中国中药杂志,2002,27(4):267—269.[6]张知侠,杨亚婷,张兴.茵陈挥发油成分的GC-MS分析[J].咸阳师范学院学报,2006,12(6):25—27.[7]胡一桥,谭r祥,褚明艳,等.茵陈粗多肽的提取分离及小鼠肝保护作用[J].中草药,1999,30(12):894—896.[8]XlAZhou,BAOANSONG,LINHONG儿N,eta1.IsolationandinhibitoryactivityagainstERKPhosphorylationofhydroxyanthraquinonesfromrhubarbi,J].Bioorganic&Medici—hal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分的影响-中国天然药物2008,6(1)目的:研究茵陈蒿汤配伍对大鼠血中移行成分的影响.方法:以中药血清药物化学为理论基础,以UPLC-UV-Q-TOF/MS为核心技术,对茵陈蒿汤不同配伍的体外体内样品进行分析比较.结果:检测并鉴定了茵陈蒿汤大鼠血中移行成分21个;21个血中移行成分中有8个成分只有在茵陈蒿汤全方配伍的情况下才能被机体吸收,而这8个成分大都具有较强的保肝利胆活性.结论:方剂为"有制之师",并非药物间的简单加合,只有在科学配伍的前提下,才能使需要的有用成分优化吸收;同时运用中药血清药物化学可进行方剂配伍规律研究.2.学位论文刘成大鼠二甲基亚硝胺肝硬化形成阶段的方证效应及其机制研究2008目的:基于茵陈蒿汤、下瘀血汤、黄芪汤、一贯煎及小柴胡汤等不同功效古典方剂干预二甲基亚硝胺诱导大鼠肝硬化的效果,探讨方证病理学基础,比较不同方剂的作用特点,阐明有效方剂的作用机制。方法:大鼠腹腔注射0.5%DMN2ml·kg-1/次、4周(每周前3日1日1次、共12次)制备肝硬化模型,造模2周末取3只正常和6只模型大鼠作用药前观察,其余模型大鼠随机分为茵陈蒿汤组、下瘀血汤组、黄芪汤组、一贯煎组、小柴胡汤组及模型对照组;各用药组于继续造模每天同时给予不同方剂的煎出液(65kg体重成人日用量的8倍)经口灌胃2周,正常大鼠与模型对照组给予等剂量生理盐水,实验第4周末处死全部大鼠,获取样本,观察以下几个部分:1.各组大鼠肝组织病理学(HE&Sirusred)、肝羟脯氨酸(Hyp)含量及肝功能;2.各组大鼠肝组织氧化应激相关:MDA含量,GST、SOD及GSH活性;3.免疫印迹检测:CD68/163、TNF-α、Fas、FasL、Bcl-2、Bax、Survivin、CytochromeC、Bcl-xL、Caspase-3/8/9/12、HGF-α、PCNA、TGF-β1(R),PDGF,MMP-13/14和TIMP-1/2蛋白表达;检测:CD68/163、TNF-α、Bax、IL-1/4/6/10、TLR-2/4、HO、CD14/36/53/44、α-SMA、Col-1(α)和TIMP-1/2mRNA水平变化;5.免疫组化检测:CD68/163、Fas、Bcl-2、TIMP-1、TGF-β1、α-SMA、HGF-α和PCNA蛋白表达位置分布用免疫组化或免疫荧光检测;6.明胶酶谱法检测:MMP-2/9活性;7.激光共聚焦检测:Heppar、CD68、CD163和α-SMA分别与TUNEL共定位;CD68分别与CD163及α-SMA。结果:1.二甲基亚硝胺大鼠腹腔注射造模2周时已形成典型的肝纤维,持续造模至4周末75%大鼠已形成肝硬化,表明该模型3-4周为肝纤维化发展至肝硬化的病理阶段。以肝组织病理学与肝功能作综合判断,茵陈蒿汤为有效方剂,黄芪汤有一定的作用。2.与正常组大鼠相比,模型大鼠肝组织MDA含量及GST活性均随模型进展显著升高,茵陈蒿汤和黄芪汤可以显著降低MDA含量(p<0.05/0.01);茵陈蒿汤和小柴胡汤可以降低GST活性(p

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